Le Ali delle Api

Parte 3: Misura del carattere VSH.

L’igiene sensibile alla varroa (VSH) può essere aggiunta a qualsiasi popolazione di api e può essere naturalmente presente in molte altre, ma solo misurando il livello di VSH un apicoltore può confermare la presenza di VSH e quindi preservare o migliorare ciò che è presente.

Le api VSH non disturbano una cella che contiene un acaro non riproduttivo. Meno del 15% delle celle infestate ha acari non riproduttivi, quindi quando si trovano acari non riproduttivi nel 40, 65 o 100% delle celle infestate da acari, sappiamo che le celle con acari riproduttivi sono state distrutte e la colonia ha rispettivamente il 50, 75 o 100% del tratto VSH.

Non aspettarti di trovare più di 1 o 2 acari non riproduttivi ogni cento celle esaminate. Per sfruttare la presenza di acari non riproduttivi, è meglio controllare la covata il prima possibile, 50-80 giorni dopo l’introduzione di una regina VSH. Questo perché le celle con acari non riproduttivi scompariranno anche dalle colonie che esprimono VSH.

È anche perfettamente 0K aspettare 3 mesi o un anno prima di testare VSH. L’intervallo da 50 a 80 giorni è consigliato solo perché è più probabile trovare acari non riproduttivi e trovare acari non riproduttivi rende più sicuri che l’assenza di acari sia causata da VSH, piuttosto che dalla possibilità che la colonia non avesse acari per qualche altro motivo. I test precoci forniscono anche un avviso precoce quando una colonia è suscettibile alla varroa.

Attrezzatura necessaria. Probabilmente il 90% dei nostri apicoltori ha già l’attrezzatura necessaria per misurare il VSH. Hai bisogno di una buona luce, un ingrandimento da 3X a 4X e una distanza focale di 4 o 5 pollici (10 – 12 cm). Puoi farlo con l’utilità di ingrandimento sul tuo iPhone o iPad oppure puoi usare un endoscopio per dissezione. Se usi un endoscopio per dissezione, potresti dover aggiungere un obiettivo da 0,5. L’obiettivo da 0,5 riduce l’ingrandimento e aumenta la distanza focale, creando così lo spazio necessario per usare le mani tra la lente di ingrandimento e il favo di covata che viene esaminato.

Utilità di ingrandimento su un telefono cellulare. I telefoni cellulari hanno una luce integrata e brillante che si trova in una posizione perfetta accanto all’obiettivo, con il vantaggio di avere ingrandimento zoom e messa a fuoco automatica. È perfetto. La mia esperienza è stata limitata all’utilità di ingrandimento su un iPhone e un iPad, ma tutti gli iPhone e gli iPad sembrano essere dotati di ingrandimento e ho capito che anche i telefoni Android hanno un’app di ingrandimento disponibile. È possibile utilizzare iPhone più vecchi, come il mio 5s di 10 anni, ma la funzione di ingrandimento è inclusa nell’app della fotocamera e non separatamente.

Posiziona il telefono su un supporto orizzontale che lo lasci a circa 6 pollici (15 cm) sopra il tavolo. Ho utilizzato elastici e una barra orizzontale fissata a un supporto pesante. Qualsiasi supporto orizzontale robusto funzionerà. Ad esempio, ho utilizzato due barre superiori legate saldamente a una pila di libri pesanti.

L’autofocus del cellulare è buono per certi versi, ma diventa un problema quando sollevi il telaino per mettere a fuoco il contenuto alla base della cella. Quando sollevi il telaino, anche l’autofocus si sposta verso l’alto, mettendo a fuoco la superficie del favo. Per risolvere questo problema, usa la funzione di blocco della messa a fuoco. Metti a fuoco la superficie del favo dove normalmente esamini una pupa che viene rimossa, quindi premi il blocco della messa a fuoco e lascialo così. Quindi, quando sollevi il pettine per mettere a fuoco la base della cella, la messa a fuoco sarà sulla base della cella.

Un problema con l’uso di un cellulare è che l’uso costante della luce scarica la batteria del telefono abbastanza velocemente. Quando valuto la covata, tengo il telefono collegato alla corrente. Quindi se lo usi in un’area senza una fonte di alimentazione, sappi che il tuo tempo di lavoro sarà limitato.

Configurazione del telefono cellulare

Configurazione dell’endoscopio per dissezione.

Campionamento. Il primo passo è raccogliere un favo che abbia pupe operaie, molte delle quali siano di almeno 7 giorni dopo l’opercolatura (pupe dagli occhi viola o più vecchie). Raccolgo da circa 9 colonie alla volta, il che mi evita di dover andare avanti e indietro all’apiario. Cerco di evitare telaini con molte larve non opercolate perché le larve non sopravvivono bene se tenute durante la notte senza operaie a temperatura ambiente, mentre la covata e le uova opercolate sopravvivono abbastanza bene.

Ho detto che controllo solo le celle operaie che sono di 7-11 giorni dopo l’opercolatura. Di seguito sono riportate 4 pupe che ho disopercolato.

La prima è troppo giovane, la seconda è di circa 6 giorni dopo l’opercolatura, quindi non abbastanza vecchia. Se una pupa è troppo giovane, lasciala e vai avanti. Una pupa di 7 giorni è la più giovane che valutiamo. Ha un corpo bianco e occhi viola scuro.

Si può valutare qualsiasi pupa che abbia gli occhi viola e sia più vecchia. Il terzo esempio è abbastanza vecchio, 9 o 10 giorni dopo l’opercolatura. L’ultimo ha perso la membrana pupale e ha espanso le ali, quindi è un adulto. Si può valutare questa fase, ma io non lo faccio. 

Quando vedi che una pupa è abbastanza vecchia, rimuovila dalla cella. Tira fuori l’ape con una pinza e cerca gli acari sull’ape e poi nella cella. Se è presente un acaro, e se è un acaro riproduttivo, di solito vedrai una macchia fecale vicino alla base della cella, più o meno a ore 10 o ore 2, con la parte superiore del favo lontana da te.

Varroa riproduttiva

Qui sopra c’è un esempio di una cella con un acaro riproduttivo. La chiazza fecale dell’acaro è in posizione ore 10. C’è sempre una membrana di muta larvale alla base della cella, ma non ha nulla a che fare con gli acari. Gli acari la ricoprono per la maggior parte (nella figura successiva mostrerò la membrana di muta larvale). La femmina fondatrice è il grande ovale marrone al centro. La progenie (un uovo e 3 ninfe) è bianca, quattro di loro. Se gli acari immaturi sono immobili, non sono morti. Diventano immobili durante la transizione da protoninfa a deutoninfa e da deutoninfa ad adulto, forse paragonabile all’immobilità delle pupe delle api.

La situazione sopra è difficile da classificare. L’acaro non è vitale perché ha solo un uovo e un uovo in questa fase non ha il tempo di raggiungere l’età adulta. A volte queste cellule non vitali hanno un uovo e anche un maschio. Quindi la cellula è riproduttiva, ma non vitale. La registro in una terza categoria come non vitale. Quindi, quando si calcola il punteggio, non la includo a meno che il punteggio non sia borderline, quindi la conto come non riproduttiva perché potrebbe non esserci stata progenie qualche giorno prima, quando la cellula era nel periodo vulnerabile per la rimozione di VSH.

Le celle con acari in riproduzione sono evidenti. Mentre le cellule con un acaro non riproduttivo o un acaro morto sono facili da non vedere, soprattutto se non c’è una macchia fecale. Una singola fondatrice è difficile da individuare contro una parete cellulare scura, così come le fondatrici morte o le fondatrici “intrappolate” tra la base della cellula e il bozzolo. Il bozzolo di un’ape operaia è simile al cellophane ed è molto sottile. Rimane come parte della parete cellulare.

Ci vogliono circa 15 minuti per esaminare 100 cellule. Se trovi 5 celle con acari riproduttivi prima di arrivare a 100, puoi smettere… quella colonia non esprime VSH.

Vista dal cellulare. Nella foto precedente, hai visto il contenuto di due celle infestate da varroa. Queste sono le celle non infestate. Nota che abbiamo una parte dello schermo occupata dal pannello di controllo sulla destra. Tocca due volte lo schermo per attivare o disattivare il pannello di controllo. Tocca l’immagine dell’ingranaggio in basso a sinistra della schermata di controllo e vai alle impostazioni (attiva solo 4 impostazioni (luminosità, contrasto, torcia e blocco della messa a fuoco).

Dieci celle sono state scoperte e 7 di esse (4 a sinistra e 3 a destra) hanno le pupe rimosse. Il materiale bianco sul fondo della cella è la membrana larvale persa, da non confondere con una chiazza di feci di acari. Una chiazza di feci di acari è un mucchio di puntini bianchi che si trovano solo nelle celle infestate da varroa. La membrana larvale persa è sempre presente nelle celle di covata che contengono una pupa. Sembra una membrana appiattita. Nessuna di queste celle è infestata da acari. Le tre celle che sono ancora occupate dalle pupe di api hanno gli occhi viola… appena abbastanza vecchie da poter essere valutate.

Macchia fecale sull’addome

Se non c’è una macchia fecale sulla parete cellulare, di solito non c’è acaro in quella cella. Tuttavia, gli acari sterili spesso posizionano la loro macchia fecale sull’ape (comunemente sull’addome dell’ape) piuttosto che sulla parete cellulare. A volte le feci dell’acaro sono sparse sulle pupe.

Non so cosa faccia sì che l’acaro cambi la posizione delle feci dalla normale posizione sulla parete cellulare al corpo dell’ape. L’unica volta che vedo la macchia fecale sull’ape è quando un acaro non produce progenie.

Parte 4: Assegna un punteggio alle tue misurazioni.

Nell’allevamento selettivo, dobbiamo assegnare un punteggio numerico al potenziale stock riproduttivo. Sebbene regine e fuchi siano le caste riproduttive, le operaie adulte sono le uniche che esprimono il tratto VSH.

Ciò richiede l’uso di metodi indiretti per assegnare un punteggio a regine e fuchi. Di seguito è riportato il metodo di assegnazione del punteggio che utilizzo. Assegna un punteggio alle api operaie su una scala da 0 a 4, con 0 che indica che le operaie non hanno nessuno degli alleli VSH e 4 che li hanno tutti. (Questo potrebbe non rappresentare la realtà, ma utilizzalo finché non troviamo qualcosa di meglio).

1. Esamina le celle di covata che siano di almeno 7 giorni dopo l’opercolatura (l’ape operaia in fase di pupa dovrebbe avere gli occhi viola o essere più vecchia).

2. Se trovi una o più celle operaie con acari non riproduttivi, usa la prima colonna per calcolare il tuo punteggio. Nella prima colonna, il numero di celle esaminate non rientra nella conversione, ma consiglio di controllare un minimo di 100 celle. Tuttavia, se trovi 5 celle con acari riproduttivi prima di raggiungere 100, potrebbe non essere necessario continuare. Se non trovi celle infestate o nessuna con acari non riproduttivi, usa la seconda colonna.

Non trovare acari è comune nelle colonie VSH che hanno avuto operaie altamente resistenti per più di 3 mesi o se la regina è stata introdotta in una colonia che aveva già un numero di acari molto basso.

Parte 5 – Registra e usa i tuoi dati.

A ogni regina accoppiata vengono assegnati tre punteggi VSH. Questi sono il punteggio della regina (la madre, Q sta per queen) che elenco per primo; il punteggio per lo sperma nella sua spermateca (lo sperma dei fuchi con cui si è accoppiata, D sta per drone), che chiamo punteggio del fuco; e il punteggio delle operaie (W: worker), il punteggio delle operaie (le sue figlie, che siano operaie o regine). Il punteggio delle operaie è l’unico che può essere misurato.

Registro questi punteggi in un raggruppamento Q(D)W, il punteggio nelle parentesi simboleggia lo sperma nella sua spermateca. Dalla punto di vista della relazione parentale, il punteggio simboleggia quello della madre dei (fuchi) con cui si è accoppiata e delle figlie. Se avessimo un’ereditarietà perfetta e misurazioni esatte, il punteggio delle operaie figlie sarebbe il punto medio tra i punteggi Q e D (madre: Q e fuchi: D).

Come ottenere i punteggi da assegnare ad una regina per tutta la sua vita? Il punteggio delle operaie (W) di una colonia è il punteggio di una qualsiasi regina che viene innestata o sostituita in quella colonia. Se non si ha un punteggio per le operaie, sue sorelle, il punteggio Q della madre non può essere valutato. Supponiamo invece che le sue sorelle abbiano ottenuto un punteggio di 3, Il suo punteggio VSH verrebbe registrato come 3 (Q=3).

Un punteggio di fuco viene aggiunto quando una regina viene accoppiata. Poiché i fuchi vengono prodotti dalle uova non fecondate della madre, hanno lo stesso punteggio della madre. Supponiamo di aver raccolto fuchi da una colonia che aveva un punteggio di regina, Q, di 2. La nostra regina ora ha un punteggio di 3(2). Se i fuchi provenissero da colonie senza punteggio o se la nostra ipotetica regina fosse stata accoppiata liberamente, il suo punteggio di fuco sarebbe sconosciuto e verrebbe registrato come un asterisco, 3(*). Se una colonia avesse una regina senza punteggio, come una regina di sciame, e se le operaie in quella colonia avessero un punteggio di 2, valuterei la regina con un punteggio seguente: *(*)2.

Per ottenere il punteggio dell’operaia, W, una regina deve produrre prole per almeno 7 settimane.

Dopo aver misurato il VSH disopercolando e controllando le celle operaie per gli acari, salvo i dati nel formato R, NR, NV / N.

R = il numero di celle con acari riproduttivi, 

NR = il numero di celle con acari non riproduttivi, 

NV = il numero di celle con acari non vitali (osservazioni borderline in cui la fondatrice ha prole, forse un maschio e/o un uovo, ma troppo tardi per produrre una femmina vitale) 

N = il numero di celle controllate. 

Quindi, se apro 100 celle e non trovo celle con un acaro riproduttivo (R=0), nessuna con un acaro non riproduttivo (NR=0) e una che era riproduttiva ma non vitale (NV=1), registrerei 0,0,1/100. Questo è un punteggio operaia di 3 (W=3)

Ora la nostra regina ha tutti i suoi punteggi. Il suo punteggio 3(2)3 e il suo conteggio del campione di 0,0,1/100 sono memorizzati sulla stessa riga del tuo foglio di calcolo della regina in colonne intitolate a punteggio e campione. Questi punteggi vengono attribuiti ad una regina per tutta la sua vita.

Supponiamo ora che un punteggio sia borderline e tu scelga di valutare di nuovo quella regina in un secondo momento. (A meno che non stia pensando di usare quella regina come allevatrice, non mi preoccuperei) Non importa se la regina si trova in una colonia diversa, purché deponga uova in quella colonia da almeno 7 settimane. Dopo aver valutato altre 100 celle, viene trovata solo 1 cella infestata da varroa e quella cella aveva un acaro riproduttivo (R=1). I dati del secondo conteggio (1,0,0/100) vengono combinati con il conteggio precedente e otteniamo 1,0,1/200, quindi la misurazione cambia, ma il suo punteggio da operaia rimane a 3 (W=3).

Se non sei soddisfatto dei risultati, soprattutto se non trovi acari e hai bisogno di sapere se la causa è VSH, inserisci un telaio di covata di operaie appena opercolate da una colonia nota per essere infestata da varroa nella colonia che vuoi testare, quindi valuta la covata su quel telaio esattamente 7 giorni dopo.

Utilizzando i tuoi dati arriviamo a questo: quando selezioni una colonia da cui innestare, scegli una colonia con un punteggio elevato di operaie. Se stai cercando una fonte di droni, scegli una colonia con un punteggio elevato di regina, Q, anche se la regina è accoppiata liberamente e ha operaie senza punteggio.

Popolazioni di acari prima e dopo che le api VSH distruggono le celle con acari riproduttivi

Cosa aspettarsi da una colonia con un punteggio di operaia pari a 4

Le colonne a sinistra rappresentano un’infestazione di varroa (nella covata operaia) prima che la popolazione di acari entri nel segmento vulnerabile (4-6) giorni dopo l’opercolatura. Si noti che in questo esempio, circa il 12% degli acari che entrano in una cella non ha prodotto prole. È vicino alla media. Non abbiamo bisogno di conoscere l’infestazione iniziale di acari perché sappiamo che una colonia non VSH ha meno del 15% della sua covata operaia con acari non riproduttivi.

Quindi, quando esaminiamo le celle 7 giorni dopo l’a capsulatura ‘opercolatura e scopriamo che tutte le celle infestate da varroa hanno acari non riproduttivi (solitamente solo 1 o 2 celle), concludiamo che tutte le celle con acari riproduttivi sono state distrutte e la colonia ha tutti gli alleli VSH. Questa è la piena espressione di VSH o un punteggio di 4 (W=4).

Lo stesso scenario prima e dopo del grafico precedente, ma in questo caso le api operaie hanno circa la metà degli alleli VSH, come quando una regina VSH si accoppia liberamente con fuchi che non portano alcun allele VSH.

Ancora una volta, l’unica misurazione che abbiamo è quella presa dalla covata più vecchia. Ma è tutto ciò di cui abbiamo bisogno. Questo è ciò che puoi aspettarti se acquisti una regina VSH si accoppia liberamente. Un punteggio di 2 produce un livello accettabile di resistenza alla varroa, abbastanza per controllare le popolazioni di acari.

VSH non influisce sulla popolazione di acari non riproduttivi. Ma poiché VSH riduce la popolazione di acari, la colonna verde degli acari non riproduttivi diminuisce proporzionalmente.

Pertanto, è comune non trovare celle con acari non riproduttivi quando si misura una colonia VSH più di 3 mesi dopo l’introduzione di una regina o quando si misura una colonia con una bassa popolazione di acari.

Parte 6: Strategie di allevamento.

Vantaggi dell’accoppiamento naturale e dell’inseminazione artificiale.

L’approccio “lascia vivere o morire” è il modo naturale di condurre un allevamento, ed io rispetto la natura. Ma noi abbiamo il potere dell’inseminazione con un singolo fuco, la natura no. La capacità di inseminare una regina con un singolo fuco ci consente di valutare un singolo gamete e quindi accelerare il processo di selezione.

C’è molta variazione genetica all’interno di una colonia quando una regina si accoppia naturalmente con più fuchi. Si accoppia con fuchi che possono provenire da colonie a molti chilometri di distanza. Una regina accoppiata liberamente finisce per avere metà del vicinato rappresentato nella sua progenie. Ciò può essere utile per l’idoneità della colonia, ma non ci consentirà di rilevare e isolare un tratto che può essere universalmente presente per consentire la frequenza.

Le inseminazioni con singolo fuco producono uniformità genetica all’interno di ogni colonia di prova e quindi rivelano differenze genetiche tra le colonie. Il modo migliore per rilevare la diversità genetica in un gruppo di colonie è inseminare un gruppo di regine, ciascuna regina con lo sperma di un singolo fuco.

Abbiamo utilizzato questo approccio nel 1995. Abbiamo avviato un esperimento con 43 colonie, ciascuna con una regina inseminata con un singolo fuco; due mesi dopo abbiamo identificato il tratto VSH in 3 delle colonie. Se ci fossimo affidati all’accoppiamento naturale, saremmo ancora alla ricerca.

Anche l’accoppiamento libero è molto potente, ma non nelle fasi iniziali dell’allevamento selettivo. Il vantaggio dell’accoppiamento naturale è il suo ruolo nella selezione dei fuchi. Quando raccogliamo i fuchi per l’inseminazione artificiale, scegliamo una colonia la cui regina ha un punteggio Q elevato. Prendiamo tutti i fuchi che riusciamo a catturare, in modo da aggirare il vantaggio della competizione tra fuchi all’interno della colonia che la natura usa così efficacemente.

Stimo che meno dell’1% dei fuchi si accoppi con successo con una regina, e quelli che ci riescono sono probabilmente quelli che:

1) non sono malati,

2) non sono parassitati dalla varroa durante il loro sviluppo,

3) hanno corpi forti e ben funzionanti,

4) provengono da colonie di successo e probabilmente, cosa più importante,

5) competono in tutte queste sfide con un solo set di cromosomi.

Quando riesce nell’accoppiamento, un fuco trasferisce copie identiche del suo gamete vincente a un’ape regina. Quindi, l’accoppiamento naturale mantiene la qualità delle nostre popolazioni di api e può anche supportare la resistenza alla varroa finché le colonie di origine dei fuchi non vengono trattate per controllare gli acari.

Il tratto VSH può essere aggiunto a qualsiasi popolazione di api. Non è una razza o una linea che deve essere mantenuta in una popolazione chiusa. Quindi, se scopri che la tua migliore regina riproduttrice è stata sostituita, considerala come un’opportunità per rinfrescare il tuo stock con fuchi selezionati dalla natura. Finché puoi misurare VSH, puoi recuperarlo.

Le api VSH non sembrano interrompere la riproduzione della varroa nella covata di fuchi. Quando controllo la covata di fuchi nelle colonie VSH, trovo acari in riproduzione.

Tuttavia, la riproduzione degli acari nella covata di fuchi non è stato un problema, quindi non rimuovo mai la covata di fuchi. Mi faccio da parte e lascio che la natura proceda con la selezione dei fuchi.